核酸檢測具體流程如下：

1.核酸提取

使用硅膠柱離心、磁性硅膠顆粒分離方法以及自動(dòng)化儀器等商品化試劑或設備并按說(shuō)明書(shū)操作。提取RNA時(shí)應注意防止RNA降解。DNA應置于-20℃保存，RNA和需長(cháng)期保存的DNA應置于-80℃保存。

2.逆轉錄合成cDNA

逆轉錄cDNA合成反應需使用逆轉錄引物、dNTPs、逆轉錄酶、RNA酶抑制劑、DTT、緩沖液和適量無(wú)RNA/DNA酶的超純水以及RNA模板。在擴增儀或水浴箱中，在規定的溫度和時(shí)間下進(jìn)行逆轉錄反應。建議使用商品化RT-PCR一步法試劑進(jìn)行第一輪擴增反應。逆轉錄cDNA合成反應需使用逆轉錄引物、dNTPs、逆轉錄酶、RNA酶抑制劑、DTT、緩沖液和適量無(wú)RNA/DNA酶的超純水以及RNA模板。在擴增儀或水浴箱中，在規定的溫度和時(shí)間下進(jìn)行逆轉錄反應。使用商品化RT-PCR一步法試劑進(jìn)行第一輪擴增反應。

3.PCR擴增反應（使用二次擴增的套式PCR擴增方法）

PCR反應需使用引物、dNTPs、DNA聚合酶（如Taq酶等）、緩沖液、和適量無(wú)RNA/DNA酶超純水、以及模板（DNA或cDNA）。在擴增儀中，按照設定的程序進(jìn)行擴增。使用二次擴增的套式PCR擴增方法。

4.擴增產(chǎn)物定性分析

擴增產(chǎn)物常用分析方法是瓊脂糖凝膠電泳法，與分子量標準比較，判斷擴增片段是否在預期的分子量范圍內。其它擴增產(chǎn)物分析方法還有限制性?xún)惹忻该盖蟹治?、特異性探針雜交分析以及DNA序列分析等。自動(dòng)化核酸擴增儀使用酶聯(lián)比色分析或熒光探針雜交等原理測定。

5.結果判定和完成報告單

（1）實(shí)驗成立的條件：每一次檢測需同時(shí)做兩個(gè)陽(yáng)性對照、兩個(gè)陰性對照，只有陽(yáng)性對照擴增出預期的片段、陰性對照沒(méi)有擴增出任何片段、雙份平行樣品結果一致的情況下實(shí)驗才成立，可以作出核酸陽(yáng)性或陰性反應結果的判定。

（2）HIV核酸檢測陽(yáng)性：發(fā)現核酸陽(yáng)性反應，應該重復采集樣品進(jìn)行復測，復測結果呈核酸陽(yáng)性反應則判定為核酸陽(yáng)性，復測結果為核酸陰性反應則判為不確定結果，需進(jìn)一步隨訪(fǎng)檢測。

（3）HIV核酸檢測陰性：只可報告本次實(shí)驗結果陰性。

（4）應在完成檢測后5個(gè)工作日內發(fā)出檢測報告。